TCEP
| TCEP | |
|---|---|
  | |
| Nome IUPAC | |
| tris(2-carbossietil)fosfina | |
| Caratteristiche generali | |
| Formula bruta o molecolare | C9H15O6P |
| Massa molecolare (u) | 250,19 |
| Numero CAS | |
| PubChem | 119411 |
| SMILES | C(CP(CCC(=O)O)CCC(=O)O)C(=O)O |
| Indicazioni di sicurezza | |
| Simboli di rischio chimico | |
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| pericolo | |
| Frasi H | 314 |
| Consigli P | 280 - 305+351+338 - 310 [1] |
Il TCEP (o tris(2-carbossietil)fosfina) è un agente riducente usato in biochimica ed in biologia molecolare. Rispetto ad altri agenti riducenti come il ditiotreitolo o il 2-mercaptoetanolo presenta il vantaggio di essere inodore, più idrofilo e più resistente all'ossidazione in aria.
Applicazioni
[modifica | modifica wikitesto]Il TCEP è spesso usato come agente riducente per rompere i legami disolfuro all'interno e tra le proteine come fase preparatoria per l'elettroforesi su gel.
Rispetto agli altri due agenti più comuni usati per questo scopo (ditiotreitolo e β-mercaptoetanolo), il TCEP ha i vantaggi di essere inodore, un agente riducente più potente, irreversibile (nel senso che il TCEP non si rigenera, in quanto il prodotto finale della scissione del disolfuro mediata dal TCEP è in realtà due tioli/cisteine liberi), più idrofilo e più resistente all'ossidazione nell'aria.[2]
TCEP è particolarmente utile quando si etichettano i residui di cisteina con maleimidi. Il TCEP può impedire alle cisteine di formare ponti disolfuro e, diversamente dal ditiotreitolo e dal β-mercaptoetanolo, non reagirà altrettanto facilmente con la maleimide.[2] Tuttavia, è stato riportato che TCEP reagisce con maleimmide in determinate condizioni.[3][4]
TCEP è anche usato nel processo di omogeneizzazione dei tessuti per l'isolamento dell'RNA.[5]
Per le applicazioni in spettroscopia UV-visibile, TCEP è utile quando è importante evitare l'assorbimento interferente da 250 a 285 nm che può verificarsi con il ditiotreitolo. Il ditiotreitolo assorbe lentamente nel tempo sempre più luce in questo spettro quando si verificano varie reazioni redox.
Note
[modifica | modifica wikitesto]- ^ Sigma Aldrich; rev. del 26.04.2012
- ^ a b TCEP technical information, from Interchim
- ^ Shafer, D. E., Inman, J. K. e Lees, A., Reaction of Tris(2-carboxyethyl)phosphine (TCEP) with Maleimide and α-Haloacyl Groups: Anomalous Elution of TCEP by Gel Filtration, in Anal. Biochem., vol. 282, n. 1, 2002, pp. 161–164, DOI:10.1006/abio.2000.4609, PMID 10860517.
- ^ Tyagarajan K, Pretzer E, Wiktorowicz JE, Thiol-reactive dyes for fluorescence labeling of proteomic samples, in Electrophoresis, vol. 24, n. 14, 2003, pp. 2348–2358, DOI:10.1002/elps.200305478, PMID 12874870.
- ^ S. S. Rhee e D. H. Burke, Tris(2-carboxyethyl)phosphine stabilization of RNA: comparison with dithiothreitol for use with nucleic acid and thiophosphoryl chemistry, in Anal. Biochem., vol. 325, n. 1, 2004, pp. 137–143, DOI:10.1016/j.ab.2003.10.019, PMID 14715294.
