UNKL
Neuređeni RING protein cinkovog prsta je protein koji je kod ljudi kodiran genom UNKL.[5]
Patricia Hartz (2017) mapirala je gen UNKL u hromosomskoj regiji 16p13.3, na osnovu poravnanja UNKL sekvence (GenBank AK022685) sa genomskom sekvencom (GRCh38).
Kloniranje i ekspresija
[uredi | uredi izvor]Korištenje aktiviranog mutanta RAC1 kao sonde u 2-hibridnom skriningu Jurkat biblioteke cDNK ljudskih T-ćelija, nakon čega je uslijedilo nekoliko rundi 5-baznog RACE-a s leukocitima ljudske periferne krvi, Lores et al. (2010) klonirali UNKL, koji su nazvali UNKL. Izvedeni protein s 680 aminokiselina ima ćetiri cinkova prsta u N-terminalnom području i domenu prstenastih prstiju blizu C-kraja. UNKL ima 87%, odnosno 40% identiteta sa ortolozima miša i roda Drosophila. Northern blot analiza otkrila je sveprisutnu ekspresiju transkripta od 4,4 kb u tkivima miša. Epitop označen UNKL bio je pretežno lociran u citosolu transficiranih HeLa ćelija, ali inhibicija eksporta jedarne energije rezultirala je jedarnom akumulacijom UNKL.[6]
Funkcija gena
[uredi | uredi izvor]Primjenom GST padajućeg test, Lores et al. (2010) potvrdili su interakciju između aktiviranog RAC-a i izoliranog C-terminala ljudskog UNKL-a, uključujući RING domen cinkovog prsta. Krajnji dio UNKL C nije stupio u interakciju sa RAC1 pune dužine, koji je pretežno bio u obliku vezanom za BDP, niti sa bilo kojom drugom testiranom malom GTPazom. C-terminalna regija UNKL-a bila je ubikvitinirana u nekoliko ljudskih ćelijskih linija, a ubikvitinacija je pojačana aktiviranim RAC1. Delecija RING domena mišjeg cinkocog prsta Unkl poboljšala je njegovu sveprisutnost. C-terminalno područje UNKL-a stupilo je u interakciju sa SWI/SNF-om podjedinicom kompleksa za preoblikovanje hromatina BAF60B, u 2-hibridnoj analizi biblioteke cDNK posteljice. UNKL nije komunicirao s drugim ispitivanim podjedinicama BAF-a. Ekspresije regijw C-terminala UNKL poboljšale je ubikvitinaciju BAF60B, a kratko razlaganje UNKL-a posredovano ukosnicama smanjilo je ubikvitinaciju BAF60B.
Aminokiselinska sekvenca
[uredi | uredi izvor]Dužina polipeptidnog lanca je 680 aminokiselina, a molekulska težina 73.828 Da.[7].
- Simboli
C: Cistein
D: Asparaginska kiselina
E: Glutaminska kiselina
F: Fenilalanin
G: Glicin
H: Histidin
I: Izoleucin
K: Lizin
L: Leucin
M: Metionin
N: Asparagin
P: Prolin
Q: Glutamin
R: Arginin
S: Serin
T: Treonin
V: Valin
W: Triptofan
Y: Tirozin
10 | 20 | 30 | 40 | 50 | ||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
MPSVSKAAAA | ALSGSPPQTE | KPTHYRYLKE | FRTEQCPLFS | QHKCAQHRPF | ||||
TCFHWHFLNQ | RRRRPLRRRD | GTFNYSPDVY | CSKYNEATGV | CPDGDECPYL | ||||
HRTTGDTERK | YHLRYYKTGT | CIHETDARGH | CVKNGLHCAF | AHGPLDLRPP | ||||
VCDVRELQAQ | EALQNGQLGG | GEGVPDLQPG | VLASQAMIEK | ILSEDPRWQD | ||||
ANFVLGSYKT | EQCPKPPRLC | RQGYACPHYH | NSRDRRRNPR | RFQYRSTPCP | ||||
SVKHGDEWGE | PSRCDGGDGC | QYCHSRTEQQ | FHPESTKCND | MRQTGYCPRG | ||||
PFCAFAHVEK | SLGMVNEWGC | HDLHLTSPSS | TGSGQPGNAK | RRDSPAEGGP | ||||
RGSEQDSKQN | HLAVFAAVHP | PAPSVSSSVA | SSLASSAGSG | SSSPTALPAP | ||||
PARALPLGPA | SSTVEAVLGS | ALDLHLSNVN | IASLEKDLEE | QDGHDLGAAG | ||||
PRSLAGSAPV | AIPGSLPRAP | SLHSPSSAST | SPLGSLSQPL | PGPVGSSAMT | ||||
PPQQPPPLRS | EPGTLGSAAS | SYSPLGLNGV | PGSIWDFVSG | SFSPSPSPIL | ||||
SAGPPSSSSA | SPNGAELARV | RRQLDEAKRK | IRQWEESWQQ | VKQVCDAWQR | ||||
EAQEAKERAR | VADSDRQLAL | QKKEEVEAQV | IFQLRAKQCV | ACRERAHGAV | ||||
LRPCQHHILC | EPCAATAPEC | PYCKGQPLQW |
Reference
[uredi | uredi izvor]- ^ a b c GRCh38: Ensembl release 89: ENSG00000059145 - Ensembl, maj 2017
- ^ a b c GRCm38: Ensembl release 89: ENSMUSG00000015127 - Ensembl, maj 2017
- ^ "Human PubMed Reference:". National Center for Biotechnology Information, U.S. National Library of Medicine.
- ^ "Mouse PubMed Reference:". National Center for Biotechnology Information, U.S. National Library of Medicine.
- ^ "Entrez Gene: UNKL unkempt homolog (Drosophila)-like".
- ^ Lores, P., Visvikis, O., Luna, R., Lemichez, E., Gacon, G. The SWI/SNF protein BAF60b is ubiquitinated through a signalling process involving Rac GTPase and the RING finger protein Unkempt. FEBS J. 277: 1453-1464, 2010. PubMed: 20148946
- ^ "UniProt, Q9H9P5". Pristupljeno 10. 7. 2021.
Dopunska literatura
[uredi | uredi izvor]- Mohler J, Weiss N, Murli S, et al. (1992). "The embryonically active gene, unkempt, of Drosophila encodes a Cys3His finger protein". Genetics. 131 (2): 377–88. PMC 1205012. PMID 1339381.
- Bonaldo MF, Lennon G, Soares MB (1997). "Normalization and subtraction: two approaches to facilitate gene discovery". Genome Res. 6 (9): 791–806. doi:10.1101/gr.6.9.791. PMID 8889548.
- Daniels RJ, Peden JF, Lloyd C, et al. (2001). "Sequence, structure and pathology of the fully annotated terminal 2 Mb of the short arm of human chromosome 16". Hum. Mol. Genet. 10 (4): 339–52. doi:10.1093/hmg/10.4.339. PMID 11157797.
- Venter JC, Adams MD, Myers EW, et al. (2001). "The sequence of the human genome". Science. 291 (5507): 1304–51. doi:10.1126/science.1058040. PMID 11181995.
- Strausberg RL, Feingold EA, Grouse LH, et al. (2003). "Generation and initial analysis of more than 15,000 full-length human and mouse cDNA sequences". Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99 (26): 16899–903. doi:10.1073/pnas.242603899. PMC 139241. PMID 12477932.
- Ota T, Suzuki Y, Nishikawa T, et al. (2004). "Complete sequencing and characterization of 21,243 full-length human cDNAs". Nat. Genet. 36 (1): 40–5. doi:10.1038/ng1285. PMID 14702039.
- Gerhard DS, Wagner L, Feingold EA, et al. (2004). "The status, quality, and expansion of the NIH full-length cDNA project: the Mammalian Gene Collection (MGC)". Genome Res. 14 (10B): 2121–7. doi:10.1101/gr.2596504. PMC 528928. PMID 15489334.
- Martin J, Han C, Gordon LA, et al. (2005). "The sequence and analysis of duplication-rich human chromosome 16". Nature. 432 (7020): 988–94. doi:10.1038/nature03187. PMID 15616553.
- Barrios-Rodiles M, Brown KR, Ozdamar B, et al. (2005). "High-throughput mapping of a dynamic signaling network in mammalian cells". Science. 307 (5715): 1621–5. doi:10.1126/science.1105776. PMID 15761153. S2CID 39457788.
- Oh JH, Yang JO, Hahn Y, et al. (2006). "Transcriptome analysis of human gastric cancer". Mamm. Genome. 16 (12): 942–54. doi:10.1007/s00335-005-0075-2. PMID 16341674. S2CID 69278.
- Kimura K, Wakamatsu A, Suzuki Y, et al. (2006). "Diversification of transcriptional modulation: large-scale identification and characterization of putative alternative promoters of human genes". Genome Res. 16 (1): 55–65. doi:10.1101/gr.4039406. PMC 1356129. PMID 16344560.