EcoRI
EcoRI (pronunciado "eco érre um") é uma enzima isolada a partir de cepas de Escherichia coli e faz parte do sistema de restrição-modificação.
| EcoRI | |
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| Indicadores | |
| Pfam | PF02963 |
| InterPro | IPR004221 |
| SCOP | 1na6 |
Em biologia molecular é utilizada como uma enzima de restrição. Ela cria extremidades coesivas com saliências na extremidade 5' de moléculas de DNA. A sequência de ácido nucleico em que ocorrem os cortes é GAATTC, que tem como sequência complementar CTTAAG.[1][2]
Esta enzima é utilizada em uma grande variedade de técnicas de genética molecular, incluindo a clonagem, triagem de DNA e supressão de segmentos de DNA in vitro. As enzimas de restrição como a EcoRI, que geram extremidades coesivas de DNA são muitas vezes utilizadas para cortar o DNA antes da reação de ligação. EcoRI pode exibir corte não-específico, dependendo das condições presentes na reação. Estas condições incluem baixa concentração de sal, concentração de glicerol elevada, quantidade excessiva de enzima presente na reação, pH elevado e contaminação por certos solventes orgânicos.[3]
- ↑ Pingoud, A., Jeltsch, A. (2001). «Structure and function of type II restriction endonucleases». Nucl. Acids Res. 29 (18): 3705–3727. PMC 55916
. PMID 11557805. doi:10.1093/nar/29.18.3705
- ↑ Kurpiewski, M. R., Engler, L. E., Wozniak, L. A., Kobylanska, A., Koziolkiewicz, M., Stec, W. J, Jen-Jacobson, L (2004). «Mechanisms of coupling between DNA recognition and catalysis in EcoRI endonucleases». Structure. 12: 1775–1788. PMID 15458627. doi:10.1016/j.str.2004.07.016
- ↑ «Cópia arquivada». Consultado em 8 de outubro de 2012. Arquivado do original em 15 de outubro de 2012