Solución tampón

 

 

As solucións amortecedoras ou tampón resisten os cambios de pH debido a que nelas se produce un equilibrio entre o ácido HA e a súa base conxugada A⁻.

HA ⇌ H⁺ + A⁻

Cando se engade algún ácido forte a unha mestura en equilibrio entre un ácido débil e a súa base conxugada, o equilibrio desprázase á esquerda, de acordo co principio de Le Châtelier. Debido a isto, a concentración de ión hidróxeno increméntanse menos da cantidade agardada tendo en conta a cantidade de ácido forte engadido. Similarmente, se se engade un álcali forte á mestura a concentración e ión hidróxeno diminúe menos da cantidade esperada tendo en conta a acantidade de álcali engadido. O efecto ilústrase pola tritración simulada dun ácido débil cun pK_a = 4,7. A concentración relativa de ácido non disociado móstrase en azul e a da súa base conxugada en vermello. O pH cambia de forma relativamente lenta na rexión tampón, pH = pK_a ± 1, centrada no pH = 4,7, onde [HA] = [A⁻]. A concentración de ión hidróxeno diminúe menos do que se esperaría porque a maioría do ión hidróxido engadido se consome na reacción

OH⁻ + HA → H₂O + A⁻

e só un pouco se consome na reacción de neutralización que é a que tería como resultado un incremento de pH.

OH⁻ + H⁺ → H₂O

Unha vez que o ácido está desprotonado en máis dun 95%, o pH elévase rapidamente porque a maioría do álcali engadido se consome na reacción de neutralización.

A capacidade de tamponamento ou amortecemento do pH, β, é unha medida cuantitativa da resistencia dunha solución tampón ao cambio de pH coa adición de ións hidróxido. Pode definirse así:

${\displaystyle \beta ={\frac {dn}{d(\mathrm {p[H^{+}]} )}}}$ 

onde dn é unha cantidade infinitesimal de base engadida e d(p[H⁺]) é o cambio infinitesimal resultante no cologaritmo da concentración de ión hidróxeno. Con esta definición a capacidade de tamponamento dun ácido débil, cunha constante de disociación de ácido K_a, pode expresarse como

${\displaystyle {\frac {dn}{d(\mathrm {pH} )}}=2.303\left({\frac {C_{\mathrm {A} }K_{\mathrm {a} }[\mathrm {H^{+}} ]}{\left(K_{\mathrm {a} }+[\mathrm {H^{+}} ]\right)^{2}}}\right)}$ 

 

onde C_A é a concentración analítica do ácido.^[3][4] O pH defínese como o −log₁₀[H⁺]. Esta ecuación mostra que hai tres rexións de aumento da capacidade de tamponamento.

1. A p[H⁺] moi baixo o termo [H⁺] do denominador predomina e a capacidade de tamponamento elévase exponencialmente coa diminución do pH.
2. A capacidade de tamponamento dun axente de tamponamento chega a un máximo local cando p[H⁺] = pK_a. Cae ao 33% do valor máximo a p[H⁺] = pK_a ± 1 e ao 10% a p[H⁺] = pK_a ± 1.5. Por esta razón o intervalo útil é aproximadamente pK_a ± 1. A capacidade de tamponamento é proporcional á concentración do axente amortecedor, C_A, polo que as solucións diluídas teñen pouca capacidade de tamponamento.
3. A p[H⁺] moi altos o segundo termo do denominador é na práctica constante e a capacidade de tamponamento elévase exponencialmente cun incremento de pH debido ao termo [H⁺] do numerador; [H⁺]=10^−pH.

As propiedades 1 e 3 son independentes da presenza ou ausencia de axentes tamponantes engadidos. Son efectos da concentración e reflicten que o pH está relacionado co logaritmo da concentración de ión hidróxeno.

As solucións tampón son necesarias para manter o pH correcto para o funcionamento dos encimas en moitos organismos. Moitos encimas funcionan só en condicións moi precisas; se o pH se move fóra dun estreito intervalo, o encima funciona máis lentamente ou deixa de funcionar e pode desnaturalizarse. En moitos casos a desnaturalización pode eliminar permanentemente a actividade catalítica.^[5]

Industrialmente, as solucións tampón son utilizadas nos procesos de fermentación e para establecer as condicións correctas para as tinturas usadas para tinguir tecidos. Tamén se usan en análises químicas^[4] e na calibración de pH metros.

A maioría das mostras biolóxicas que se usan en investigación entán feitas en tampóns, especialmente o tampón fosfato salino (PBS, do inglés phosphate buffered saline) a pH 7,4.

No organismo no plasma sanguíneo hai un tampón de ácido carbónico (H
2 CO
3) e bicarbonato (HCO−
3), que mantén o pH entre 7,35 e 7,45. Dentro das células funciona o tampón fosfato.

Axente tamponador	pKa	Intervalo de pH útil
Ácido cítrico	3,13, 4,76, 6,40	2,1–7,4
Ácido acético	4,8	3,8–5,8
KH2PO4	7,2	6,2–8,2
CHES	9,3	8,3–10,3
Borato	9,24	8,25–10,25

Para tampóns nas rexións ácidas, o pH pode ser axustado a un valor desexado engadindo un ácido forte como o ácido clorhídrico a un axente tamponador. Para os tampóns alcalinos, pode engadirse unha base forte como o hidróxido sódico. Alternativamente, unha mestura tampón ou amortecedora pode facerse mesturando un ácido e a súa base conxugada. Por exemplo, un tampón acetato pode facerse pola mestura de ácido acético e acetato de sodio. Similarmente, un tampón alcalino pode facerse a partir dunha mestura dunha base e o seu ácido conxugado.

Combinando substancias con valores de pK_a que difiren en só dous ou menos e axustando o pH, pode obterse unha ampla variedade de tampóns. O ácido cítrico é un compoñente útil dunha mestura porque ten tres valores de pK_a, separados por menos de dous. O rango de tampón pode ser ampliado engadindo outros axentes tamponadores. As seguintes mesturas (solucións tampón McIlvaine) teñen un rango de tamponamento do pH 3 ao 8.^[6]

0,2 M Na2HPO4 (mL)	0,1 M ácido cítrico (mL)	pH
20,55	79,45	3,0
38,55	61,45	4,0
51,50	48,50	5,0
63,15	36,85	6,0
82,35	17,65	7,0
97,25	2,75	8,0

Pode facerse unha mestura que conteña ácido cítrico, fosfato de monopotasio, ácido bórico e ácido dietil barbitúrico para cubrir o intervalo de pH do 2,6 ao 12.^[7]

Outros tampóns universais son o tampón Carmody^[8] e o tampón Britton-Robinson, desenvolvido en 1931.

Para os rangos efectivos ver capacidade de tamponamento, arriba.

Nome común	Estrutura	pKa a 25 °C	Efecto da temperatura dpH/dT (K−1)[9]	Peso molecular
TAPS		8,43	−0,018	243,3
Bicina		8,35	−0,018	163,2
Tris		8,06	−0,028	121,14
Tricina		8,05	−0,021	179,2
TAPSO		7,635		259,3
HEPES		7,48	−0,014	238,3
TES		7,40	−0,020	229,20
MOPS		7,20	−0,015	209,3
PIPES		6,76	−0,008	302,4
Cacodilato		6,27		138,0
MES		6,15	−0,011	195,2

A expresión do equilibrio é

HA ⇌ A⁻ + H⁺

Isto mostra que cando o ácido se disocia prodúcense cantidades iguais de ión hidróxeno e do anión. As concentracións de equilibrio destes tres compoñentes poden calcularse nunha táboa ICE, siglas de "iniciais" (condicións), "cambio" e "equilibrio".

Táboa ICE para ácidos monopróticos

	[HA]	[A−]	[H+]
I	C0	0	y
C	−x	x	x
E	C0 − x	x	x + y

Na primeira fila, denominada I, indícanse as condicións iniciais: a concentración de ácido é C₀, inicialmente non disociado, polo que a concentración de A⁻ e H⁺ sería cero; y é a concentración inicial de ácido forte "engadido", como o ácido clorhídrico. Se se engade un álcali forte, como o hidróxido de sodio y terá un signo negativo porque o álcali retira ións hidróxeno da solución. A segunda fila, denominada C por cambio, especifica os cambios que ocorren cando o ácido se disocia. A concentración de ácido diminúe nunha cantidade de −x e as concentracións de A⁻ e H⁺ increméntanse ambas nunha cantidade de +x. Isto derívase da expresión de equilibrio. A terceira fila, denominada E por concentracións de equilibrio, engádese conxuntamente as dúas primeiras filas e mostra as concentracións no equilibrio.

Para calcular x, úsase a fórmula para a constante de equilibrio en termos de concentracións:

${\displaystyle K_{\mathrm {a} }={\frac {[\mathrm {H^{+}} ][\mathrm {A^{-}} ]}{[\mathrm {HA} ]}}}$ 

Substitúense as concentracións cos valores atopados na última fila da táboa ICE:

${\displaystyle K_{\mathrm {a} }={\frac {x(x+y)}{C_{0}-x}}}$ 

Simplifícase a:

${\displaystyle x^{2}+(K_{\mathrm {a} }+y)x-K_{\mathrm {a} }C_{0}=0}$ 

Con valores específicos para C₀, K_a e y esta ecuación pode resolverse para x. Como o pH = −log₁₀[H⁺], o pH pode calcularse como pH = −log₁₀(x + y).

 

Os ácidos polipróticos son ácidos que poden peder máis dun protón. A constante de disociación do primeiro protón pode indicarse como K_a1 e as constantes de disociación dos sucesivos protóns como K_a2 etc. O ácido cítrico, H₃A, é un exemplo de ácido poliprótico, xa que pode perder tres protóns.

Equilibrio	valor do pKa
H3A ⇌ H2A− + H+	pKa1 = 3,13
H2A− ⇌ HA2− + H+	pKa2 = 4,76
HA2− ⇌ A3− + H+	pKa3 = 6,40

Cando a diferenza entre sucesivos valores de pK_a é menor de tres hai solapamento entre os rangos de pH de existencia das especies en equilibrio. Canto menor é a diferenza, maior é o solapamento. No caso do ácido cítrico, o solapamento é amplo e as solucións de ácido cítrico son tamponadas no seu rango completo do pH 2,5 ao 7,5.

O cálculo do pH cun ácido poliprótico require realizar uns cálculos de especiación. No caso do ácido cítrico, isto implica a solución das dúas ecuacións de equilibrio de masas seguintes

${\displaystyle C_{\mathrm {A} }=[\mathrm {A^{3-}} ]+\beta _{1}[\mathrm {A^{3-}} ][\mathrm {H^{+}} ]+\beta _{2}[\mathrm {A^{3-}} ][\mathrm {H^{+}} ]^{2}+\beta _{3}[\mathrm {A^{3-}} ][\mathrm {H^{+}} ]^{3}}$ 

${\displaystyle C_{\mathrm {H} }=[\mathrm {H^{+}} ]+\beta _{1}[\mathrm {A^{3-}} ][\mathrm {H^{+}} ]+2\beta _{2}[\mathrm {A^{3-}} ][\mathrm {H^{+}} ]^{2}+3\beta _{3}[\mathrm {A^{3-}} ][\mathrm {H^{+}} ]^{3}-K_{\mathrm {w} }[\mathrm {H^{+}} ]^{-1}}$ 

C_A é a concentración analítica do ácido, C_H é a concentración analítica dos ións hidróxeno engadidos, β_q son as constantes de asociación acumulativas

${\displaystyle \log \beta _{1}=\mathrm {p} K_{\mathrm {a3} },\quad \log \beta _{2}=\mathrm {p} K_{\mathrm {a2} }+\mathrm {p} K_{\mathrm {a3} },\quad \log \beta _{3}=\mathrm {p} K_{\mathrm {a1} }+\mathrm {p} K_{\mathrm {a2} }+\mathrm {p} K_{\mathrm {a3} }}$ 

K_w é a constante de autoionización da auga. Hai dúas ecuacións simultáneas non lineares en dúas cantidades descoñecidas [A³⁻] e [H⁺]. Disponse de moitos programas informáticos para facer este cálculo. O diagrama de especiación do ácido crítico obtívoe usando o programa HySS.^[10]

• "Biological buffers". REACH Devices. 
• Calculador on line do pH de tampóns
• Tampón fosfato